Perolehan Bahan Baku Viral

Skrining Diet Buatan Dalam Ruangan

Berdasarkan kebiasaan makan Helicoverpa armigera, 3 sampai 5 formulasi pakan buatan disaring. Setelah optimalisasi, formulasi yang mendukung pemeliharaan berkelanjutan dan kapasitas bertelur tinggi dipilih untuk produksi.

Pemeliharaan Helicoverpa armigera di dalam ruangan

Ulat kapas yang ditangkap di alam liar didomestikasi melalui sistem pemberian pakan substitusi bertahap: pakan nabati murni → campuran sayuran dan pakan buatan → pakan buatan lengkap, untuk membentuk strain laboratorium untuk pemeliharaan massal.

Inokulasi Virus

Ketika sekitar 80% larva mencapai instar ke-3, benih virus yang telah dimurnikan (bebas dari bakteri lain-lain) diencerkan menjadi suspensi virus dengan konsentrasi 1,0×10⁴ hingga 1,0×10⁷ PIB/mL, yang dicampur ke dalam pakan untuk pakan larva.

Koleksi Larva Mati yang Sakit

Pengamatan dimulai 3 hari setelah pemberian makanan yang terkontaminasi virus. Larva yang mati dan hampir mati dengan tubuh bengkak dan perut kemerahan dikumpulkan dua kali sehari (pagi dan sore) sampai pengumpulan selesai.

Ekstraksi dan Pengawetan Virus

Air deionisasi dalam jumlah yang sesuai ditambahkan ke mayat larva, dan campuran tersebut digiling menjadi bubur menggunakan homogenizer multifungsi. Penggilingan dihentikan setelah ukuran partikel memenuhi spesifikasi.

Deteksi dan Penghitungan

Identifikasi dan penghitungan kuantitatif masing-masing dilakukan dengan menggunakan mikroskop elektron dan mikroskop optik. Subpackaging dilakukan setelah melewati pemeriksaan.

Penyimpanan Virus

Suspensi virus yang memenuhi syarat diisi ke dalam drum plastik tertutup dan disimpan di gudang dingin pada suhu -10℃ hingga -20℃ untuk penggunaan selanjutnya.