Aktivitas insektisida dan efek kontrol biologis Autogra pha californica multiplenucleopolyhedrovirus ((AcMNPV) pada larva Spodoptera frugiperda

Abstrak

Ulat grayak, Spodoptera frugiperda, adalah salah satu hama terpenting pada jagung, yang baru saja menginvasi Tiongkok. Untuk mengetahui pengaruh pengendaliannya Autographa californica multiple nucleopolyhedrovirus (AcMNPV) pada larva S.frugiperda, aktivitas insektisida dan efek biokontrol AcMNPV pada S.frugiperda dipelajari dan dianalisis dengan metode bioassay dan uji efikasi lapangan.₅₀)dari AcMNPV yang bekerja pada 2^danlarva instar S.Frugiperda sebesar 2,9x 10⁷PIB/mL. Khasiat kontrol rata-rata 10⁷Suspensi PIB/mL AcMNPV+Bt (1500 mL/hm²) pada S.frugiperda adalah 68,99% pada tanggal 10^thhari dan 66,87% pada tanggal 15^thsehari setelah pemberian. Terakhir, digunakan software DNAMAN 6.0 untuk mengidentifikasi homologi DNA serangga yang mati, dan hasilnya menunjukkan bahwa urutan gen polh, kiri-8 dan kiri-9 serangga mati dan S．Frugiperda berjumlah 100 % identik. Semua hasil di atas dapat memverifikasi lebih lanjut bahwa AcMNPV mungkin memainkan peran penting dalam mengendalikan S．frugiperda．Disarankan agar 10⁷PIB/mL AcMNPV＋Bt suspensi (1500mL/hm²) sebaiknya diterapkan pada puncak kemunculan larva muda S.frugiperda, dan setelah pukul 16.00-17.00 pada hari yang cerah untuk menghindari pengaruh suhu dan cahaya tinggi, sehingga persiapan virus dapat berperan lebih baik. berperan dan meningkatkan efek pengendaliannya terhadap S.frugiperda．

Kata Kunci: AcMNPV;Spodoptera frugiperda;Hama Lepidopteran;larva;bio-pestisida;AcMNPV＋ Suspensi Bt;aktivitas insektisida;pencegahan dan pengendalian hijau

Spodoptera frugiperda adalah hama migrasi omnivora yang pertama kali masuk ke Tiongkok dari Myanmar pada tahun 2019 dan dengan cepat menyebar ke 1.518 distrik di 26 provinsi dan kota di Tiongkok, sehingga menimbulkan ancaman serius terhadap ketahanan pangan Tiongkok. Hingga saat ini, dalam strategi pengendalian Ulat Grayak, Pengendalian wabah ulat grayak masih bergantung pada penggunaan pestisida kimia secara berlebihan.Penggunaan pestisida kimia yang berlebihan dapat dengan mudah menyebabkan resistensi hama, merajalelanya kembali dan residu serta pencemaran lingkungan.Serangkaian masalah serius telah membatasi pembangunan berkelanjutan pertanian modern. Oleh karena itu, penggunaan metode pengendalian hayati atau substitusi biopestisida.Penggunaan pestisida untuk mengendalikan ulat grayak menjadi semakin penting dan mendapat perhatian yang semakin besar.

Autographa californica multiple nucleopolyhedrovirus AcMNPV adalah virus polihedrosis nuklir tertanam multi-butir yang diisolasi dari larva Argyria alfalfa. Virus ini dapat menginfeksi silang lebih dari 30 jenis hama lepidopteran seperti ngengat bit, ngengat kubis, Argyria argyra, dan Calyptera teristoides, The tipe campuran dengan Bt dan insektisida lain serta virus hama non-target sebagai sinergis memiliki efek sinergis yang jelas pada banyak hama Noctuidae, dan semakin memperluas spektrum insektisida serta meningkatkan efek insektisida.AcMNPV adalah biopestisida virus serangga baru yang dikembangkan oleh Wuhan Unioasis Biological Technology Co., LTD.Ini adalah kombinasi virus polihedrosis nuklir Argyria alfalfa dan sinergis virus Bt yang kuat.Dengan aktivitas insektisida yang baik, A telah banyak diaplikasikan pada sayuran, pohon buah-buahan, padi dan lahan lainnya.Dalam makalah ini, aktivitas insektisida dan efek biokontrol Autographa californica multiple nucleopolyhedrovirus (AcMNPV) terhadap Spodoptera frugiperda dideteksi dan dievaluasi melalui uji aktivitas laboratorium dan eksperimen lapangan, untuk memberikan dukungan data untuk penerapan luas virus polihedrosis nuklir di pengendalian hayati Spodoptera frugiperda pada jagung.Ini memberikan dasar teori untuk pendaftaran dan penerapan agen suspensi AcMNPV plus Bt dalam pengendalian Ulat Grayak.

1.Bahan dan metode

1.1Uji virus dan agen biologis

Virus yang diuji adalah Autographa californica multiple nucleopolyhedrovirus (AcMNPV) Pada tanggal 20 Mei 2019, Spodoptera frugiperda dikumpulkan dari ladang jagung di Kota Xiantao, Provinsi Hubei, dan uji skrining infeksi virus dilakukan di laboratorium Wuhan Unioasis Biological Technology Co. , LTD.(Di mana Autographa Californica multiplenucleopolyhedrovirus AcMNPV memiliki aktivitas infeksi yang tinggi terhadap Spodoptera frugiperda), Larva Spodoptera frugiperda dibesarkan untuk tumbuh dan berkembang biak. Larva mati yang terinfeksi virus digiling dengan air, disaring melalui 3 lapis kain kasa, dan filtratnya disentrifugasi pada 600r/mnt dan 300r/mnt. Jumlah mikronya adalah 1,8 ×10¹⁰polihedra virulen per mL(Polyhedralinclusionbody PIB), yaitu untuk mendapatkan nilai teknis murni dari virus polihedrosis (1,8 x 10¹⁰PIB/mL), diawetkan dalam suhu rendah dan sisihkan.

Agen hayati yang diuji adalah Autographa california nuklir polyhedrosis.Bacillus thuringiensis disingkat AcNPV.Bt (1,0 ×107 PIB/mL).Ini dikembangkan oleh Wuhan Unioasis Bilogical Technology Co., LTD dan diproduksi oleh anak perusahaannya Wuhan Chuqiang Biological Technology Co., LTD.

1.2Uji serangga

Serangga percobaan yang digunakan adalah Spodoptera frugiperda.Pada tanggal 20 Juli 2019, larva Spodoptera frugiperda dikumpulkan dari ladang jagung musim panas di desa Banqiao, Kota Dachangzhen, Kabupaten Tongshan, Provinsi Hubei, dan dibawa kembali ke laboratorium Institut Penelitian Tanah Perlindungan Tanaman dan Pupuk dari Akademi Pertanian Hubei. Ilmu Pengetahuan.Daun jagung segar dan empuk dimasukkan satu kepala ke dalam cawan petri plastik sekali pakai (diameter 8cm, tinggi 3cm).Kondisi makan di dalam ruangan adalah :(25±1) ℃ dan kelembaban relatif 60%-70%, fotoperiode 16L:8D.Setelah reproduksi beberapa generasi, blok telur segar dan steril disimpan untuk digunakan.

1.3Aktivitas laboratorium Autographa californica multiple nucleopolyhedrovirus (AcMNPV) terhadap spodoptera frugiperda

Enam gradien konsentrasi, 1,0 ×10⁹, 1,0×10⁸, 1,0×10⁷, 1,0×10⁶, 1,0×10⁵, 1,0×10⁴dirancang dalam percobaan ini. Pertama, TC AcNPV diencerkan menjadi 1,0 ×10⁹PIB/mL, kemudian diencerkan sebanyak 10 kali hingga diperoleh pengencer lain dengan konsentrasi berbeda. Percobaan dilakukan dengan kontrol blanko. Sebanyak 7 proses dilakukan, dengan masing-masing proses diulang sebanyak 3 kali.

Metode pemberian pakan ruas daun yang dilakukan yaitu daun muda jagung segar (panjang 2cm × lebar 2cm) diberi semprotan suspensi virus terlebih dahulu, kemudian larva diberi makan, dan kepala tunggal dimasukkan ke dalam cawan petri.Strip pakannya adalah: suhu (25±1)℃, fase hingga kelembapan (60% ~ 70%), fotoperiode (16L:8D). Setelah daun jagung beracun dimakan, daun jagung segar tidak beracun harus ditambahkan segera.48 larva ulat grayak instar kedua diobati berulang kali. Referensi bagian 9{9-11} , Mengingat perubahan perkembangbiakan virus dalam sel dan inang keluarga ngengat, jumlah serangga yang mati akibat virus dan jumlah total serangga mati diselidiki pada hari ke 7 dan 10 setelah infeksi, kemudian dihitung angka kematian dan dihitung LC50.

1.4Uji lapangan pengaruh pengendalian suspensi 10 juta AcMNPV.Bt terhadap larva ulat grayak

Uji efikasi lahan dilakukan di ladang jagung musim panas di desa Xiaoyuan, Kota Chuangwang, Kabupaten Tongshan, Provinsi Hubei.Plot uji totalnya 1500m^２, jenis tanah adalah tanah berkapur, nilai pH 6,8, kandungan bahan organik 13,9%, dan kesuburan sedang hingga tinggi. Jagung ditanam sepanjang tahun, dan varietas jagung Xiyu No. 3. Pada tanggal 13 Juli ,2020, pupuk majemuk 45% 750kg//hm^２akan diaplikasikan sebagai pupuk dasar dan disemai.Sejak tahun 2019, telah terjadi kejadian serius ulat grayak di lahan ini.

Sebanyak 10 juta suspensi AcMNPV.BT (1500mL/ hm²) dan 15% emamektin benzoat. Suspensi Indocarb (300mL/ hm²), insektisida yang umum digunakan dan kontrol blangko diberi perlakuan dengan 3 perlakuan.Setiap perlakuan diulang sebanyak 4 kali, sehingga total terdapat 12 petak percobaan yang masing-masing seluas 100m2.²

Pada sore hari tanggal 26 Agustus 2020 (saat larva Spodoptera frugiperda sering muncul), semprotkan pestisida satu kali pada malam hari.Semprotan listrik ransel multifungsi 3WBJ-16DZ merek Lebang digunakan, dengan tekanan kerja 0,40~0,60 MPa, diameter lubang 1mm, dan laju aliran 60~85L/jam.Hari pemberian pestisida cerah, dengan suhu 23-32 ℃.Lakukan survei pada hari ke-1, ke-3, ke-5, ke-7, ke-10, dan ke-15 setelah permohonan.Selama penyelidikan, diambil 10 titik pengambilan sampel secara acak dari setiap plot, dan 10 tanaman disurvei secara terus menerus di setiap titik, sehingga totalnya ada 100 tanaman.Jumlah serangga hidup, kematian, keracunan, dan musuh alami pada setiap tanaman jagung dicatat.Rumus perhitungan yang relevan adalah sebagai berikut;

Laju penurunan serangga =(jumlah serangga hidup sebelum aplikasi - jumlah serangga hidup setelah aplikasi)/jumlah serangga hidup sebelum aplikasi

Efek pencegahan dan pengendalian=( Penurunan jumlah serangga di area perlakuan- Penurunan jumlah serangga di area kontrol)/(100- Penurunan jumlah serangga di area kontrol)*100%

1.5Identifikasi molekuler ACMNPV

1) Uji sampel virus.Pilih larutan induk ACMNPV untuk penentuan aktivitas dalam ruangan (sampel 1), persiapan biologis 10 juta ACMNPV.Bt SC (sampel 2), bangkai serangga yang terinfeksi virus setelah uji kemanjuran di lapangan (sampel 3), dan larva ulat grayak generasi kedua yang terinfeksi bangkai serangga dikumpulkan dalam sampel 3 (sampel 4) sebagai sampel uji virus, untuk memverifikasi apakah AcMNPV dalam 10 juta ACMNPV.Bt memiliki aktivitas bakterisidal terhadap larva ulat grayak.

2) ekstraksi DNA.Ambil 1,0 mL sampel AcMNPV, tambahkan 99,0 mL air suling, dan osilasi menyeluruh selama 1 menit.Ambil suspensi 300μL setelah osilasi, tambahkan 100μL larutan alkaline cracking, penangas air pada suhu 37 ℃ selama 30 menit.Tambahkan 200μL buffer Tris·HCl dan sentrifugasi pada 10.000 putaran/menit selama 8 menit.Ambil supernatan ke dalam tabung centrifuge, tambahkan 5μL Protease K dan 60 μL SDS, waterbath pada suhu 65 ℃ selama 2 jam, angkat dan dinginkan hingga suhu kamar.Tambahkan 650μL Campur L Tris jenuh fenol dengan baik, sentrifugasi dengan kecepatan 10000 putaran/menit selama 5 menit, dan masukkan supernatan ke dalam tabung sentrifugasi baru.Tambahkan 650μL cairan campuran fenol dan kloroform (perbandingan volume 1:1), sentrifugasi dengan kecepatan 10000 putaran/menit selama 5 menit, lalu masukkan supernatan ke dalam tabung sentrifugasi baru.Tambahkan 650μL cairan campuran kloroform dan isoamil alkohol (perbandingan volume 24:1), sentrifugasi dengan kecepatan 10000 putaran/menit selama 5 menit, dan terakhir masukkan supernatan ke dalam tabung sentrifugasi baru.Ukur konsentrasi DNA menggunakan spektrofotometer.

3) amplifikasi PCR.Menggunakan sistem standar super mix T3: Sampel DNA 2 μL. Primer 0,5μL untuk sebelum dan sesudah, T3 super mix 18μL dan ddH₂O7μL.Kondisi amplifikasi PCR adalah 95 ℃.Setelah 3 menit pradenaturasi, dilakukan siklus berikut: 98 ℃ selama 15 detik, 52 ℃ selama 20 detik, 72 ℃ selama 20 detik, dan terakhir 72 ℃ selama 5 menit, total 42 kali siklus.

4) Elektroforesis gel DNA agarosa.Ambil produk amplifikasi PCR 2μL dan DNA Marker 5 kb dan masukkan ke dalam gel agarosa, dan elektroforesis pada 180 V selama 20 menit.Setelah elektroforesis, amati produk PCR dalam sistem pencitraan gel.

Primer hulu Polh:

AGGGTTTCCCAGTCACGGGCTGAG-GATCCTTT

Primer hilir Polh:

GAGCGGATAATTTCACACTGGTGTGTG-CAAACTCCTT

Primer hulu Lef-8:

AGGGTTTCCCAGTCCACGCACGGGAAAT-GAC

Primer hilir Lef-8:

GAGCGGATAATTTCACATTGTACGGATCTTTCGGC

Primer hulu Lef-9

AGGGTTTCCCAGTCACGAAACGGGTACGCGG

Primer hilir Lef-9:

GAGCGGATAATTTCACATTGTCACCGTCAGTC

Terakhir, terapkan perangkat lunak DNAMAN6.0 untuk membandingkan urutan polh, kiri-8, dan kiri-9 yang diukur.

1.6Analisis dan pengolahan data

Data eksperimen diolah menggunakan perangkat lunak analisis statistik data IBM SPSS 22.0.

Dalam percobaan penentuan aktivitas insektisida virus, jumlah serangga mati dan serangga hidup yang diberi perlakuan dengan masing-masing konsentrasi dihitung, dan angka kematian serta persentase kematian yang disesuaikan dihitung, dan diubah menjadi nilai probabilitas.Konsentrasi setiap perlakuan diubah menjadi nilai lg.Persamaan regresi virulensi (kemiringan ± SE) dihitung melalui nilai probabilitas kerja dan bobot, serta LC₅₀Nilai dan batas kepercayaannya 95%, dan terakhir lakukan uji chi-kuadrat (²).Pada percobaan efek pengendalian lapangan, jumlah serangga hidup pada setiap perlakuan dihitung, dan laju pengurangan hama dihitung.Efek kontrol dihitung menggunakan rumus pengeditan Microsoft Excel.Metode Duncan digunakan untuk analisis, dan ANOVA satu arah digunakan untuk membandingkan perbedaan signifikan antar perlakuan,

Bagan dalam teks semuanya dibuat menggunakan perangkat lunak Microsoft Excel.

2.Hasil dan Analisis

2.1Aktivitas insektisida AcMNPV terhadap larva Spodoptera frugiperda

Hasil pengujian aktivitas dalam ruangan (Tabel 1) menunjukkan bahwa setelah 7 hari perlakuan, LC₅₀aksi AcMNPV pada larva instar 2 Spodoptera frugiperda adalah 4.1x10⁷PIB/mL, dan LC₉₀adalah 1,05x10⁸PIB/mL.Setelah 10 hari pengobatan, LC₅₀aksi AcMNPV pada larva instar 2 adalah 2,9x10⁷PIB/mL, dan LC₉₀adalah 7,8x10⁷PIB/mL.LC₅₀dan LC₉₀aksi AcMNPV pada larva ulat grayak instar 2 setelah 7 hari perlakuan keduanya lebih tinggi dari 10 hari, menunjukkan bahwa AcMNPV menunjukkan aktivitas insektisida yang baik terhadap larva Spodoptera frugiperda pada hari ke 7.

2.2 Efek pengendalian lapangan dari AcMNPV.Bt bekerja pada larva Spodoptera frugiperda

Hasil uji efikasi lapangan menunjukkan 10 juta AcMNPV.Bt SC (1500 mL/hm²) mempunyai efek yang relatif lambat terhadap larva spodoptera frugiperda.Rata-rata pengaruh kontrol pada hari ke-1, ke-3, dan ke-5 setelah penyemprotan masing-masing sebesar 11,57%, 16,23%, dan 15,56%.Rata-rata pengaruh pengendalian pada hari ke 7 setelah penyemprotan hanya sebesar 21,88%.Namun pada hari ke 10 setelah penyemprotan, efek pengendalian serangga tiba-tiba meningkat menjadi 68,99%, dan rata-rata efek pengendalian pada hari ke 15 setelah penyemprotan juga sebesar 66,87%.Namun dibandingkan dengan bahan kimia Emamectin Benzoate+ Indoxair Conditioningarb 15% (300mL/hm²), ini memiliki efek membunuh yang baik pada larva spodoptera frugiperda, yang dapat dengan cepat mengurangi jumlah populasi serangga.Rata-rata efek kontrol pada hari ke-1, ke-3, ke-5, dan ke-7 setelah pemberian obat masing-masing sebesar 91,39%, 92,66%, 90,71%, dan 87,19%.Namun rata-rata control effect pada hari ke 10 mulai menurun hanya menjadi 67,63% dan rata-rata control effect pada hari ke 15 menurun menjadi 51,60%.Lihat Tabel 2 untuk rinciannya.

Pada saat yang sama, kami juga menemukan bahwa tingkat penurunan serangga di area kontrol bernilai negatif pada hari ke-1, ke-3, dan ke-5 setelah perlakuan, yang menunjukkan adanya peningkatan jumlah serangga.Pada hari ke 7 setelah pengobatan mulai positif (populasi serangga mulai berkurang).Rata-rata laju penurunan jumlah serangga pada hari ke-10 dan ke-15 masing-masing sebesar 38,25% dan 47,00%, hal ini kemungkinan besar disebabkan oleh fakta bahwa beberapa larva Spodoptera frugiperda mulai menjadi kepompong di dalam tanah dan generasinya tumpang tindih setelah 10-15 hari. .

Ringkasnya terlihat bahwa 10 juta AcMNPV.Bt SC (1500 mL/hm²) memiliki efek kontrol tertentu terhadap Spodoptera frugiperda, tetapi efeknya lambat, dan kemanjurannya sekitar 10-15 hari setelah aplikasi.

2.3 Pengaruh AcMNPV.Bt pada musuh alami

Selama percobaan lapangan, efek 10 juta AcMNPV.Suspensi Bt pada musuh alami hama jagung seperti laba-laba, kepik, dan kumbang juga diteliti.Hasil penelitian menunjukkan bahwa 10 juta AcMNPV.Suspensi Bt tidak menimbulkan kerusakan yang berarti terhadap musuh alami seperti laba-laba, kepik, dan kumbang, dengan rata-rata terdapat 13,4 musuh alami per 100 tanaman.Namun bahan kimia suspensi Emamectin Benzoate+ Indoxair Conditioningarb 15% mempunyai efek toksik yang signifikan terhadap musuh alami seperti laba-laba, kepik, dan kumbang.Pada hari pertama setelah perlakuan rata-rata jumlah musuh alami pada 100 tanaman jagung hanya 3,1, dan pada hari ketiga setelah perlakuan hanya ditemukan 5,2 musuh alami berbagai jenis (Gambar 1).Terlihat 10 juta AcMNPV.Suspensi Bt mempunyai efek perlindungan yang baik terhadap musuh alami hama, sedangkan suspensi Emamectin Benzoate+ Indoxair Conditioningarb 15% menyebabkan kerusakan yang relatif lebih besar terhadap musuh alami.

2.4 Identifikasi molekul AcMNPV

Hasil amplifikasi PCR sampel uji beda menunjukkan bahwa fragmen amplifikasi polh, kiri-8, dan kiri-9 sampel 1, 2, 3, dan 4 konsisten dan tepat ukurannya.Produk PCR gen polh, kiri-8, dan kiri-9 masing-masing sebesar 0,54, 0,716, dan 0,29 kb (Gambar 2) yang membuktikan bahwa AcMNPV mempunyai aktivitas insektisida terhadap larva spodoptera frugiperda.

Terakhir, perangkat lunak DNAMAN 6.0 digunakan untuk melakukan penyelarasan urutan pada fragmen polh, kiri-8, dan le.f-9 yang diamplifikasi dalam sampel 1, 2, 3, dan 4 (Gambar 3).Hasil penelitian menunjukkan bahwa kemiripan sekuens polh, kiri-8, dan kiri-9 yang diamplifikasi pada sampel 1, 2, 3, dan 4 adalah 100%, yang menunjukkan bahwa sampel 1, 2, 3, dan 4 semuanya berasal dari virus yang sama AcMNPV.

3. Diskusi

AcMNPV merupakan virus serangga berbentuk batang yang menginfeksi tubuh serangga melalui makanan.Virus ini berkembang biak dan menyebar ke seluruh tubuh serangga, lambat laun menginfeksi seluruh tubuh dan akhirnya menyebabkan kematian.Hasil penelitian ini menunjukkan bahwa AcMNPV mempunyai aktivitas biologis yang baik terhadap larva Spodoptera frugiperda.LC-nya pada hari ke 7 dan 10 masing-masing sebesar 4,1x107 dan 2,9x107PIB/m, dan menunjukkan efek pengendalian yang baik di lapangan.Suspensi campuran 10 juta AcMNPV.Bt (1500 mL/hm²) memiliki rata-rata efek pengendalian yang baik pada hari ke 10 dan 15 setelah perlakuan, masing-masing mencapai 68,99% dan 66,87%, serta aman terhadap musuh alami.Oleh karena itu, kecepatan penelitian dan pengembangan harus dipercepat agar AcMNPV dapat berperan lebih besar dalam pengendalian hayati Spodoptera frugiperda.Suspensi 10 juta AcMNPV.Bt yang diproduksi oleh Wuhan Chuqiang Biotechnology Co., Ltd. merupakan senyawa AcMNPV dan biopestisida Bacillus thuringiensis (Bt), yang secara signifikan dapat meningkatkan aktivitas insektisida virus.Karena Bt merupakan insektisida berspektrum luas dengan aktivitas insektisida mikroba yang baik, bila AcMNPV dikombinasikan dengan Bt, toksisitasnya akan meningkat secara signifikan dibandingkan dengan formulasi tunggal.Hal ini tidak hanya memperluas jangkauan insektisida Bt, namun juga meningkatkan toksisitasnya, sehingga mencapai tujuan penggunaan formulasi tunggal untuk mengendalikan banyak hama.Hal ini juga yang menjadi alasan mengapa penangguhan 10 juta AcMNPV.Bt dapat dipromosikan secara luas pada sayuran, pohon buah-buahan, dan padi.Oleh karena itu, 10 juta AcMNPV.Bt dapat dipromosikan sebagai agen pengendali hijau untuk Spodoptera frugiperda pada jagung

Dalam penelitian ini, ketika melakukan uji efikasi lapangan, jika terjadi penurunan populasi serangga yang cepat di area kontrol (laju penurunan serangga pada hari ke-15 mencapai 47,00%), rata-rata efek pengendalian sebesar 10 juta AcMNPV.Bt suspensi (1500mL/hm²) pada hari ke 15 setelah pengobatan adalah 66,87%, menunjukkan tren peningkatan yang pesat.Sedangkan rata-rata pengendalian efek pestisida kimia 15% metoksazol · indefencarb SC (300 mL/hm²) pada hari ke 15 setelah perlakuan mengalami penurunan menjadi 51,60%.Meskipun terlihat bahwa suspensi 10 juta AcMNPV.Bt (1500 mL/hm²) mempunyai efek pengendalian tertentu terhadap Spodoptera frugiperda pada hari ke 10 sampai ke 15, mengingat lambatnya efektivitas pestisida hayati dan umur pendek serta generasi larva Spodoptera frugiperda yang tumpang tindih, disarankan untuk meningkatkan jumlah penyelidikan dan memperpanjang waktu penyelidikan ketika melakukan uji coba kemanjuran pestisida hayati di lapangan (khususnya sediaan virus), yang dapat mencapai hasil percobaan yang lebih ideal.Ini juga merupakan keterbatasan penelitian ini.Ringkasnya, dibandingkan dengan agen biologis, agen kimia memiliki efek membunuh hama yang relatif lebih tinggi dan memberikan efek yang cepat.Mereka dapat digunakan sebagai tindakan pencegahan dan pengendalian darurat selama wabah hama.Ketika kerusakan akibat hama terjadi dalam jumlah yang relatif kecil, pestisida biologis dapat menggantikan pestisida kimia sebagai salah satu tindakan pencegahan dan pengendalian ramah lingkungan, sehingga mengurangi pencemaran lingkungan dan mencapai efek melindungi ekologi pertanian.

Selain itu, gen Polh (polihedrin) yang digunakan dalam penelitian ini merupakan jenis promotor protein polihedral, dan P10 merupakan promotor yang paling umum digunakan dalam sistem vektor ekspresi baculovirus (BEVS), keduanya sangat diekspresikan pada tahap akhir. dari infeksi virus^[13].Namun aktivitas promotor p10 lebih rendah dibandingkan dengan promotor polh, sehingga promotor polh sering digunakan untuk ekspresi protein eksogen.Gen kiri-8 dapat mengkodekan subunit terbesar dari RNA polimerase virus itu sendiri, dan merupakan jenis faktor ekspresi akhir.^[14].kiri-9 adalah jenis faktor ekspresi akhir yang mengkodekan subunit kompleks protein dengan kiri-4, kiri-8, dan p47 pada baculovirus.Penelitian menemukan bahwa virus yang tidak memiliki gen lef-9 tidak dapat menghasilkan partikel virus yang memiliki aktivitas menular, sedangkan virus dengan gen lef-9 dapat memulihkan aktivitas infeksi virus dengan memulihkannya.Oleh karena itu, gen kiri-9 merupakan gen penting bagi baculovirus untuk membentuk BV (Budded Virus) dengan aktivitas menular.^[15].Terlihat bahwa gen lef-8 dan kiri-9 mempunyai konservatisme yang tinggi pada berbagai jenis virus polihedrosis nuklir, sehingga gen kiri-8 dan kiri-9 dapat digunakan sebagai dasar untuk mengidentifikasi jenis virus.Oleh karena itu, penelitian ini menggunakan polh, kiri-8, dan kiri-9 sebagai objek deteksi, dan melalui penyelarasan urutan gen, homologinya tinggi, semuanya mencapai 100%.Metode deteksi molekuler cepat sekali lagi membuktikan bahwa AcMNPV memiliki aktivitas insektisida yang baik terhadap Spodoptera frugiperda, sehingga cocok untuk promosi dan penerapan lebih lanjut dalam pencegahan dan pengendalian Spodoptera frugiperda.

Sejak tahun 2019, Spodoptera frugiperda telah menginvasi Tiongkok dan menjadi hama penting jagung.Penyakit ini telah membentuk populasi menetap di beberapa wilayah di Tiongkok selatan dan barat daya, menyebabkan kerugian besar pada industri jagung Tiongkok dan secara serius mengancam ketahanan pangan Tiongkok.^[16].Menghadapi situasi pencegahan dan pengendalian Spodoptera frugiperda yang parah saat ini di Tiongkok, percepatan penyaringan dan pengembangan pestisida yang efisien untuk pencegahan dan pengendalian Spodoptera frugiperda sangatlah mendesak.^[17].Meskipun insektisida virus memiliki keterbatasan dalam penerapannya secara luas karena kecepatan kerjanya yang lambat dan spektrum insektisida yang sempit, dalam konteks meningkatnya perhatian terhadap ekologi dan perlindungan lingkungan, insektisida baculovirus diperkirakan akan semakin banyak digunakan dalam produksi pertanian karena keunggulannya yang signifikan dibandingkan insektisida virus. pestisida tradisional.Karena kerentanan sediaan virus serangga terhadap kondisi eksternal seperti suhu tinggi, sinar matahari, hujan, dan umur hama [18].Oleh karena itu, dianjurkan untuk menggunakan pestisida pada masa puncak munculnya larva hama.Sebaiknya digunakan setelah pukul 16:00-17:00 pada hari-hari cerah untuk menghindari dampak kondisi lingkungan yang merugikan seperti suhu tinggi dan cahaya, sehingga formulasi virus dapat memainkan perannya dengan lebih baik dan meningkatkan efek pengendalian terhadap hama. .